Мультиферментная амплификация (MIRA)

Мультиферментная изотермическая быстрая амплификация (Multienzyme Isothermal Rapid Amplification).

MIRA — это технология мультиферментной изотермической быстрой амплификации нуклеиновых кислот, основанная на синергии нескольких функциональных белков при комнатной температуре для достижения быстрой амплификации нуклеиновых кислот. Это по-настоящему быстрая и мобильная технология детекции нуклеиновых кислот.

Ниже комнатной температуры:
• Рекомбиназа и праймер образуют комплекс с помощью вспомогательных белков и одноцепочечных связывающих белков.
• Найдите гомологичную последовательность и объедините целевой домен гомологии, при этом в гомологическом положении формируется область D-петли и происходит замена цепи.
• Когда рекомбиназа диссоциирует от комплекса, полимераза также связывается с 3'-концом праймера, а затем начинает удлинение цепи.

Принципиальная техническая схема:



Ключевые особенности:

• Скорость - результаты могут быть получены в течение 5-20 минут
• Точность обеспечивается благодаря высокой чувствительности и специфичности
• Простота - регенты позволяют работать с оборудованием при комнатной температур

Гибкость и быстрота: время обнаружения сокращено до 1/6 от традиционной ПЦР
Более низкая стоимость и более высокая эффективность: амплификация при постоянной температуре от 3,7 С до 42 °С, без сложного оборудования, с высокой скоростью и эффективностью, лучшей совместимостью и стабильностью.
Простота и эффективность: лиофилизированные/микросферные реагенты, транспортировка и работа при комнатной температуре; может реализовать одноэтапную операцию.




Точность и быстрота: завершение детекции за 5-20 минут, более сильная синергия мультифермента с большой специфичностью и чувствительностью
Безопасность и надежность: реакция при 3,7°С-42°С, риск аэрозольного загрязнения значительно снижен
Простота и удобство: 2 праймера, простой принцип работы, удобный для обнаружения нуклеиновых кислот патогенных микроорганизмов, таких как бактерии и вирусы (множественные мутации).

Элемент	MIRA	PCR	LAMP
Принцип технологии	Мультиферментная изотермическая быстрая амплификация	Полимеразная цепная реакция	Изотермическая амплификация, опосредованная петлей
Функциональный фермент	Одноцепочечный связывающий белок, полимеразы, рекомбиназы и т. д.	ДНК-полимераза	Bst ДНК-полимераза
Температура реакции	9-42°С постоянная температура	95°С-55°С-72°С переменная температура	65°С постоянная температура
Время реакции	5-20 минут	1.5-2 часа	40-60 минут
Праймеры	2	2	4-6
Состояние реагента	Жидкость/сублимированная/микросферы	Жидкость	Жидкость
Оборудование	Термостатическое оборудование (металлическая ванна, водяная баня и т. д.)	ПЦР-инструментарий	Термостатическое оборудование
Работоспособность	Операция чрезвычайно проста и позволяет реализовать настоящую портативность	Высокие эксплуатационные требования и сложная эксплуатация оборудования	Простое управление
Аэрозольное загрязнение	Усиление при комнатной температуре для снижения риска аэрозольного загрязнения	Высокая температура, риск аэрозольного заражения	Высокая температура, риск аэрозольного заражения